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      當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠胰腺星狀細(xì)胞
      大鼠胰腺星狀細(xì)胞

      產(chǎn)品簡介

      大鼠胰腺星狀細(xì)胞的相關(guān)*:氯(Cl)定量檢測試劑盒 50次
      血液鈣(Ca)定量檢測試劑盒 50次
      血液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 50次
      體液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 50次
      血液鎂離子(Mg)濃度反應(yīng)光譜法定量檢測試劑盒 20次
      體液鎂離子(Mg)濃度反應(yīng)光譜法定量檢測試劑盒 20次

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-18
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:302
      詳細(xì)介紹在線留言
      品牌其他品牌貨號GOY-01X0751
      規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      產(chǎn)品屬性:  

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      大鼠胰腺星狀細(xì)胞

      5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X0751

      商品介紹:

      名稱    大鼠胰腺星狀細(xì)胞  

      2.組織來源:胰腺組織

      3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

      4.細(xì)胞簡介:

      大鼠胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達(dá)Desmin蛋白,活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達(dá)alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin,48hDesmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá)alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA,而不再表達(dá)Desmin,說明細(xì)胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活,傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的大鼠胰腺星狀細(xì)胞采用膠原酶制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質(zhì)量檢測:

      實驗室分離的大鼠胰腺星狀細(xì)胞經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

      7.培養(yǎng)信息:

      培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產(chǎn)品貨號CM-R016

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

      傳代特性可傳2-3

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

      冷凍保存細(xì)胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

      88.jpg

      實驗報告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

      2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

      5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       KNG1 / BDK 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

       PAPPA2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

       CD208 基因全長ORF克隆

       LBP 基因全長ORF克隆

       RPGR 轉(zhuǎn)錄變體A 基因全長ORF克隆

       Semaphorin 3E 基因全長ORF克隆

       SPG3A 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

       SPG21 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

       SSSCA1 基因全長ORF克隆

       FANCL 基因全長ORF克隆

      大鼠胰腺星狀細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人腸血管活性肽受體2 ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Type III iodothyronine deiodinase

      0.156-10 ng/mL 人生長停滯特異性蛋白6(GAS-6)ELISA試劑盒

      麥康凱瓊脂(含結(jié)晶紫) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 2

      0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Very low-density lipoprotein receptor

      豬膽粉 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      78-5000 pg/mL 人卵固蛋白同族物2(Ovostatin homolog 2)ELISA試劑盒

      BBL瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:BBL Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      腸道菌增菌肉湯(EE) 英文名稱:Enterobacteria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

       


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