5637 (人膀胱癌細胞)

產品簡介
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產品廠地：上海市

更新時間：2025-03-05

廠商性質：經銷商

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品牌	其他品牌	貨號	GOY-01X0002
規格	1×10?cells/T25培養瓶	供貨周期	現貨
主要用途	產品僅供科研使用	應用領域	化工

公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱	5637 (人膀胱癌細胞)
規格	1×10?cells/T25培養瓶
貨號	GOY-01X0002

產品介紹：

名稱 5637 (人膀胱癌細胞)

種屬人類

年齡（性別）男性，68歲

組織來源膀胱；癌

生長特性貼壁細胞

細胞形態上皮細胞樣

背景描述 5637細胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。

生物安全等級 1

生長培養基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~24-36小時

凍存條件凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

致瘤性 Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.

注意事項該細胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細胞收縮變圓，輕拍培養瓶側邊，細胞可以滑落方可終止消化。

細胞特點及處理：

產品特點:
1、使用方便:不需昂貴設備。
2、可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
6、紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。

細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

QQ截圖20210907103850.png

細胞培養技巧：

一、凍存時的注意事項：
1. 在冷凍保存之前，應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高，凍存的細胞密度為80 – 90 ％優良
2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質，例如是否有雜細胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應為試劑級等級，以5~10 ml 小體積分裝，4 度避光保存，勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級，以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。
4. 冷凍保存的細胞濃度：
4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，細胞濃度不要太高，某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。
4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6，依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 ％ DMSO，若是不確定細胞之冷凍條件，在做冷凍保存之同時，亦應作一個backup culture，以防止冷凍失敗。

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使用方法：

收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

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