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      當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒微量法β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法
      β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法

      產(chǎn)品簡介

      β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法的相關(guān)產(chǎn)品:磷脂酶C(PLC)測試盒微量法磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法磷脂酶D(PLD)測試盒微量法磷脂酶D(PLD)測試盒可見分光光度法硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)測試盒微量法硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)測試盒紫外分光光度法

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時(shí)間:2025-03-04
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:623
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      品牌其他品牌貨號(hào)GOY-SH132
      規(guī)格100管/48樣供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途僅供科研研究實(shí)驗(yàn)應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)
      檢測方法微量法產(chǎn)品類別糖代謝系列
      品牌谷研貨期現(xiàn)貨

      正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

      商品屬性:

      產(chǎn)品名稱

      β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法

      規(guī)格

      100管/48樣

      檢測方法

      微量法

      貨號(hào)

      GOY-SH132

      產(chǎn)品分類

      糖代謝系列

      用途

      僅供科研實(shí)驗(yàn)


      β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法

      測定意義:

      β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
      測定原理:
      β-1,3-GA水解昆布多糖,內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產(chǎn)生還原末端,通過測定還原糖生成速率來計(jì)算其酶活性。
      自備儀器和用品:
      可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

      試劑的組成和配制:

      提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

      提取液二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

      試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

      試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存;

      組織樣本的前處理:

      ①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

      ②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

      建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

      測定步驟:

      1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

      2、 樣本測定

      (1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

      (2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

      (3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開始計(jì)時(shí),記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

      A2,計(jì)算 ΔA=A1-A2。

      GAPDH 活性計(jì)算

      (1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

      單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

      (2)按樣本鮮重計(jì)算

      單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

      (3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

      單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

      生化檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明:

      一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

      包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。

      氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,特點(diǎn)是測定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL。

      二、氧化系列生化檢測試劑盒

      包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫(H2O2)檢測、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

      蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

      特點(diǎn)是:1.測定組織樣本、細(xì)胞、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量。2.樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長。


      β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法


      三、抗逆系列生化檢測試劑盒

      包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

      超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

      特點(diǎn)是:1.測定血清,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。

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