產(chǎn)品簡介

P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)的相關(guān)*：人體胚胎干細(xì)胞條件培養(yǎng)基 100毫升
人體胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基 100毫升
小鼠胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基 100毫升
大鼠胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基 100毫升
滋養(yǎng)細(xì)胞法胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒 10次
明膠法人體胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒 10次

產(chǎn)品屬性： 

商品介紹：

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

猴子雌激素(E)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛羥脯(Hyp)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

山羊催乳素(PRL)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

雞天門冬氨基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

雞白介素6受體(IL-6R)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

1,3-二甘油酸(1,3-DPG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

綿羊免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

促生長激素釋放激素(GHRH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

抗血小板抗體IgA(PA-IgA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

檸檬酸合成,線粒體(CS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

P388D1 (小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)1 管 Turbo大腸桿菌 Turbo E.coli Strain -80℃保存

2 ug pSG1154 pSG1154 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50次 柱式白色念珠菌RNAout  

2 ug pCL-Ampho pCL-Ampho 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

四環(huán)素檢定瓊脂 Tetracyline Examination Agar 250g

100g L- 鹽酸鹽 L-Ornithine HCl   密封干燥保存

50T 犬細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存