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      產(chǎn)品中心

      當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系HFF (包皮成纖維細(xì)胞)
      HFF (包皮成纖維細(xì)胞)

      產(chǎn)品簡介

      HFF (包皮成纖維細(xì)胞)的相關(guān)*:細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒 20次
      組織可溶性總蛋白制備試劑盒 20次
      植物組織可溶性總蛋白粗提制備試劑盒 20次
      植物組織可溶性總蛋白*制備試劑盒 20次
      植物組織可溶性疏水總蛋白制備試劑盒 20次
      植物組織可溶性親水總蛋白制備試劑盒 20次

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-28
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:298
      詳細(xì)介紹在線留言
      品牌其他品牌貨號GOY-01X0611
      規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

      冷凍保存細(xì)胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

      QQ截圖20210907103850.png

      產(chǎn)品屬性:   

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      HFF (包皮成纖維細(xì)胞)

      1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X0611

      商品介紹:

      名稱    HFF (包皮成纖維細(xì)胞)   

      年齡(性別)男

      生長特性貼壁細(xì)胞

      細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

      生物安全等級1

      生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

      推薦傳代比例0.0430555555555555

      推薦換液頻率2~3/

      凍存條件

      凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

      溫度:液氮

      培養(yǎng)條件

      氣相:空氣,95%CO25%

      溫度:37℃

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

      2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

      5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       UCN2 基因全長ORF克隆

       PIANP / C12ORF53 基因全長ORF克隆

       KRT17 基因全長ORF克隆

       CALD1 基因全長ORF克隆

       CALCA 基因全長ORF克隆

       TMED3 基因全長ORF克隆

       PDGFD 基因全長ORF克隆

       CMTM7 基因全長ORF克隆

       FAM176B 基因全長ORF克隆

       BRSK1 基因全長ORF克隆

      HFF (包皮成纖維細(xì)胞)0.312-20 ng/mL 人Sal樣蛋白2(SALL2)ELISA試劑盒

      乳糖發(fā)酵管(軍團菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

      0.312-20 ng/mL 人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL 人母體胚胎拉鏈激(MELK)ELISA試劑盒

      31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Thyrotropin receptor

      0.156-10 ng/mL 人鱗狀細(xì)胞癌抗原2ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase

      0.156-10 ng/mL 人基質(zhì)金屬蛋白28(MMP-28)ELISA試劑盒

      78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs

      0.156-10 ng/mL 人配對免疫球蛋白樣2型受體β(PILRB)ELISA試劑盒

       


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