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      大鼠羊膜胚胎細胞

      產品簡介

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      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-27
      廠商性質:經銷商
      訪問量:372
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1359
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

      88.jpg

      產品屬性:   

      產品名稱

      規格

      貨號

      大鼠羊膜胚胎細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X1359

      商品介紹:

      名稱    大鼠羊膜胚胎細胞   

      2.組織來源:胎盤組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      大鼠胚胎羊膜細胞分離自羊膜組織;羊膜為單層上皮細胞互相連接構成的薄膜。單層上皮細胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長發育,羊膜與絨毛密切緊貼,形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴大而呈半透明的薄膜,無血管,富有韌性(胎膜也就是羊膜腔的囊壁)。羊膜腔內充滿的液體為羊水。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面,并不深入胎盤組織中,隨著妊娠的進展羊膜腔逐漸擴大,占據整個子宮腔,羊膜是胎膜最內一層,是一層半透明的薄膜,與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內層,與人眼結膜組織結構相似,含有眼表上皮細胞,包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質,其光滑,無血管、神經及淋巴,具有一定的彈性,厚0.02~0.5mm,在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜基質層含有大量不同的膠元,主要為iiiiivvvii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份,正是這些成份使羊膜可以充當移植的基底膜"而發揮一種新的健康合適的基質。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成,均具有多分化潛能,可轉化為神經元,且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養因子的功能。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的大鼠羊膜胚胎細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的大鼠羊膜胚胎細胞PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

      培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產品貨號CM-R234

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態梭形、多角形

      傳代特性可傳3代左右

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       Galactolipase / PNLIPRP2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       RCN3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       RNase A / Ribonuclease A / RNASE1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       CNPY4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       ERP72 / PDIA4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       ERP72 / PDIA4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       TMEM27 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       CLDN11 / Claudin-11 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       CFHR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      大鼠羊膜胚胎細胞α-連環蛋白抗體(鈣粘蛋白相關蛋白)Catenin αHuman CEP290 ELISA Kit人前列腺素D合成(PGDS)ELISA試劑盒,

      癌易感基因2相互作用蛋白抗體Human CD4(T-cell surface glycoprotein CD4) ELISA Kit人血紅蛋白晚期糖基化終末產物(Hb-AGE)ELISA試劑盒,

      質連接蛋白1抗體Human CEP350 ELISA Kit大鼠雄(androgen)ELISA試劑盒,

      盤狀結構域受體蛋白2抗體Human  CD9(CD9 antigen) ELISA Kit大鼠同型半胱(Hcy)ELISA試劑盒,

      膜糖蛋白CD200抗體Human CEP44 ELISA Kit大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒,

      胰羧肽A1抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒,

      羧肽A2抗體Human CEP55 ELISA Kit兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒,

      腦源性球蛋白超家族蛋白3抗體Human CD94 ELISA Kit抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒--動物,人

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