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      支氣管平滑肌細胞

      產(chǎn)品簡介

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      酯(CHE)活性比色法定量檢測試劑盒 20次

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-27
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:441
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X0735
      規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產(chǎn)品屬性:   

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      支氣管平滑肌細胞

      5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X0735

      商品介紹:

      名稱    支氣管平滑肌細胞   

      2.組織來源:支氣管組織

      3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

      4.細胞簡介:

      支氣管平滑肌細胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由支氣管分出的各級分枝,由支氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能:支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態(tài);支氣管平滑肌特異的超微結構特點和調(diào)節(jié)機制是支氣管正常生理功能的基礎;支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的人支氣管平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質(zhì)量檢測:

      實驗室分離的人支氣管平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養(yǎng)信息:

      培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產(chǎn)品貨號CM-H012

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態(tài)成纖維細胞樣

      傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       CPA4 基因全長ORF克隆

       IL8Rb 基因全長ORF克隆

       BACE2 基因全長ORF克隆

       BLK Kinase 基因全長ORF克隆

       IL22BP / L22RA2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

       CD70 / CD27L / TNFSF7 基因全長ORF克隆

       Integrin beta5 基因全長ORF克隆

       Angiopoietin-like1 基因全長ORF克隆

       BuB1 基因全長ORF克隆

       CD40 / TNFRSF5 基因全長ORF克隆

      支氣管平滑肌細胞78-5000 pg/mL 人NAD依賴性脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human High mobility group protein HMGI-C

      0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Plasma protease C1 inhibitor

      阿奇檢定培養(yǎng)基 英文名稱:Azithromycin Test Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 7

      1.56-100 ng/mL 人2,5寡腺苷酸合成1(OAS1)ELISA試劑盒

      胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)(ISO9038-1-2000) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human C-type natriuretic peptide

      酵母蛋白胨培養(yǎng)基 英文名稱:Yeast Extract Peptone 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human 60 kDa heat shock protein, mitochondrial

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