產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠表皮角化上皮細(xì)胞的相關(guān)*：豬白介素13(IL-13)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
豬白介素12(IL-12/P70)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
豬白介素12(IL-12/P40)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
豬白介素10(IL-10)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豬白介素1(IL-1)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性：  

商品介紹：

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 RAB27B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 KCT2 / C5orf15 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 GALNT2 / GalNAc-T2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 COL5A2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 PNLIPRP1 / PLRP1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

 SMR3B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠表皮角化上皮細(xì)胞1-丁基-3-甲基咪唑六氟鹽 97%肼黃 85%Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) /FITC  熒光素標(biāo)記化5-脂氧合抗體IgG

1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽 97%柯衣定 ARAnti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) /FITC  熒光素標(biāo)記化5-脂氧合抗體IgG

1-丁基-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽 97%香紫蘇內(nèi)酯 97%Anti-5-HTT/SERT/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體IgG

1-丁基-4-甲基吡六氟鹽 99%S-聯(lián)萘酚 99%Anti-8-OHdG/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷蛋白抗體IgG

冠6烯 98%雙(二苯基膦) 98%Anti-AACT-Alpha1 /RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記α-1抗胰糜蛋白IgG

冠-8-烯 90%1,2-雙(二苯基膦)乙烷  98%Anti-AACT-Alpha1/FITC  熒光素標(biāo)記α-1抗胰糜蛋白

環(huán)己硫  98%1,1'-雙(二-叔丁基膦基)二茂鐵 98%Anti-AAK1/FITC  熒光素標(biāo)記AP2關(guān)聯(lián)激1抗體IgG

4-氯吡-2-甲酸甲酯 98%1,5-雙(二苯基膦)戊烷  97%Anti-AARS2/FITC  熒光素標(biāo)記氨酰tRNA合成2抗體IgG