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      大鼠神經干細胞

      產品簡介

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      組織磷脂D1(Phospholip

      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-27
      廠商性質:經銷商
      訪問量:354
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1117
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產品屬性:   

      產品名稱

      規格

      貨號

      大鼠神經干細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X1117

      商品介紹:

      名稱    大鼠神經干細胞   

      2.組織來源:腦組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      大鼠神經干細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經干細胞具有分化為神經神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有神經組織中,不同的神經干細胞類型產生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經干細胞在疾病、損傷狀態下具有增殖、遷移,并向神經細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力,已成為神經系統損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩定的神經干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。神經干細胞在培養3-4d后,可形成神經球,神經球在培養基中呈懸浮生長,予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養瓶中,2×105個細胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養基1次,培養條件不變。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的大鼠神經干細胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁,結合神經干細胞專用培養基培養篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的大鼠神經干細胞Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      培養基含B-27 Supplement、EGFbFGFPenicillin、Streptomycin

      產品貨號CM-R139

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性懸浮

      細胞形態球形

      傳代特性可傳2-3

      消化液0.25%胰蛋白酶,Accutase

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

      小鼠 IL22RA2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       Integrin beta5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

      類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, CRF07_BC) GP120 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       HNF4A 轉錄變體3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

       B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

       POT1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       VSIG4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

       ITGAV 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

      雪貂 IFNG 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

       AMD1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

      大鼠神經干細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Keratin, type II cytoskeletal 1

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Protein O-linked-mannose beta-1, 2-N-acetylglucosaminyltransferase 1

      0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human B-lymphocyte antigen CD19

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Granzyme A

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      平板計數瓊脂(PCA) 英文名稱:Plate Count Agar 產品規格:250g

      15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon-induced transmembrane protein 10

      乳糖發酵培養基 英文名稱:Lactose Broth 產品規格:250g

      0.156-10 ng/mL 人解偶聯蛋白2(UCP-2)ELISA試劑盒

      胰蛋白胨大豆肉湯 英文名稱: 產品規格:250g

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