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      當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞兔肺大動脈平滑肌細胞
      兔肺大動脈平滑肌細胞

      產品簡介

      兔肺大動脈平滑肌細胞的相關*:熒光或共聚焦顯微鏡制片封片處理液(熒光穩定) 5/20毫升
      抗淬滅劑Ⅰ(活體染色持久發光) 5/20毫升
      抗淬滅劑Ⅱ(熒光增強、持久發光) 5毫升
      組織切片制片處理試劑專題
      冰凍切片制片處理試劑盒 10次
      冰凍切片制片預處理固著液 100毫升

      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-26
      廠商性質:經銷商
      訪問量:348
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X0723
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產品屬性:   

      產品名稱

      規格

      貨號

      兔肺大動脈平滑肌細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X0723

      商品介紹:

      名稱    兔肺大動脈平滑肌細胞   

      2.組織來源:肺動脈組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      兔肺大動脈平滑肌細胞分離自肺大動脈組織;肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經肺門入肺。肺動脈干位于心包內,為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺大動脈平滑肌細胞是肺血管的重要結構細胞之一,在調控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。肺大動脈平滑肌細胞的異常是肺動脈高壓發生發展的重要病理學特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進肺大動脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發生發展。肺大動脈平滑肌細胞主要功能:細胞表面表達介質(ICAM-1VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺大動脈平滑肌細胞與主要病生理變化:平滑肌增生易致肺動脈高壓;先天性肺動脈狹窄;肺動脈栓塞。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的兔肺大動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的兔肺大動脈平滑肌細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產品貨號CM-Rb009

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態成纖維細胞樣

      傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       NPY 基因全長ORF克隆

       IL10Rb 基因全長ORF克隆

       IL13Ra1 基因全長ORF克隆

       C1QB 基因全長ORF克隆

       GPX3 基因全長ORF克隆

       S100A6 基因全長ORF克隆

       GDF-9 基因全長ORF克隆

       CLCF1 基因全長ORF克隆

       GDF-15 基因全長ORF克隆

       WBSCR22 基因全長ORF克隆

      兔肺大動脈平滑肌細胞0.156-10 ng/mL 人唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素10(Siglec-10)ELISA試劑盒

      N6培養基 英文名稱:N6 Medium 產品規格:250g

      7.5%氯化鈉肉湯 英文名稱:7.5% Sodium Chloride Broth 產品規格:250g

      3%NaCl阿拉伯糖 英文名稱: 產品規格:20支

      31.2-2000 pg/mL 豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

      0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Prolyl 4-hydroxylase subunit alpha-2

      0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human B-cell lymphoma 3 protein

      0.156-10 ng/mL 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1

      0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Oxysterols receptor LXR-alpha

       


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