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      當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞小鼠腸神經嵴干細胞
      小鼠腸神經嵴干細胞

      產品簡介

      小鼠腸神經嵴干細胞的相關*:豬β干擾素(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒進口、分裝
      豬α干擾素(IFN-α)免疫試劑盒現貨供應
      豬αN乙酰葡糖胺糖苷(NAGLU)免疫試劑盒*直銷
      豬α1酸性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒進口、組裝
      豬Tau蛋白免疫試劑盒進口、分裝

      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-26
      廠商性質:經銷商
      訪問量:395
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1317
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產品屬性:   

      產品名稱

      規格

      貨號

      小鼠腸神經嵴干細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X1317

      商品介紹:

      名稱    小鼠腸神經嵴干細胞   

      2.組織來源:腸組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      小鼠腸神經嵴干細胞分離腸組織;神經嵴干細胞(neural crest stem cellsNCSC),即外周神經系統干細胞,起源于胚胎期的神經管背側,與中樞神經系統干細胞在形態學上有著顯著不同,NCSC可表達低親和力神經營養因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質細胞,而中樞神經系統干細胞與之恰好相反。NCSC可在不同部位分化出多種組織,如神經元、神經膠質、黑色素細胞、內分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等,其中可特異性分化出腸神經系統中神經元和神經膠質的NCSC,被稱為腸神經嵴干細胞(gut neural crest stem cellsGNCSC)。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      培養基含B-27 SupplementEGFbFGFPenicillinStreptomycin

      產品貨號CM-M216

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性懸浮

      細胞形態球形

      傳代特性可傳2-3

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       PLAC9 / Placenta-specific 9 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       PLBD2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      食蟹猴 ART4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      食蟹猴 IL2RA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      食蟹猴 CD160 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      IL13RA2 / IL13R 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      CXCL16 / SR-PSOX 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

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