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      產(chǎn)品中心

      當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞角膜成纖維細(xì)胞
      角膜成纖維細(xì)胞

      產(chǎn)品簡介

      角膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移I(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE I)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
      細(xì)胞肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移II(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE II)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
      組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE)活性比色法定量檢測試劑盒

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-20
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:365
      詳細(xì)介紹在線留言
      品牌其他品牌貨號GOY-01X1095
      規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

      冷凍保存細(xì)胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產(chǎn)品屬性:   

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      角膜成纖維細(xì)胞

      5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X1095

      商品介紹:

      名稱    角膜成纖維細(xì)胞   

      2.組織來源:眼角膜組織

      3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

      4.細(xì)胞簡介:

      角膜成纖維細(xì)胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。角膜成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的人角膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質(zhì)量檢測:

      實驗室分離的人角膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

      7.培養(yǎng)信息:

      培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產(chǎn)品貨號CM-H131

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

      傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;

      5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

      2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

      5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       CD28 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       CD28 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

       FVII / F7 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       FVII / F7 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

       F9 / FIX 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       MYC 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       EZH2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       EZH2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

       HSPA8 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       CDC25A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

      角膜成纖維細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-microseminoprotein

      0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Transcription factor 21

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Hypoxia-inducible factor 1-alpha

      0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats

      葡萄糖銨 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

      0.47-30 ng/mL 人DnaJ同系物亞科B成員3(DNAJB3)ELISA試劑盒

      抗生素檢定培養(yǎng)基6號(7.8-8.0) 英文名稱:Antibiotic Agar No.6 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      39-2500 pg/mL 人殺菌性通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒

      15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Troponin T, cardiac muscle

      0.156-10 ng/mL 人瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道亞科V成員1(TrpV1)ELISA試劑盒

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