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      小鼠小腸Cajal間質細胞

      產品簡介

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      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-18
      廠商性質:經銷商
      訪問量:346
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1265
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產品屬性:   

      產品名稱

      規格

      貨號

      小鼠小腸Cajal間質細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X1265

      商品介紹:

      名稱    小鼠小腸Cajal間質細胞   

      2.組織來源:小腸組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      小鼠小腸Cajal間質細胞分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。Cajal間質細胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質細胞,是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞,與肌細胞以及末梢神經元有著緊密的關系,具有激發和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術,清楚觀察到了ICC位置分布和內部精細結構;應用免疫熒光等生化技術,發現了其特殊表達的c-kit蛋白;利用電生理技術,得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關。多年來,學者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發現了ICC的蹤跡,并試圖闡述其與某些疾病的發生機制。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質細胞采用膠原酶消化法結合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質細胞經c-kit免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產品貨號CM-M195

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態成纖維細胞樣

      傳代特性可傳1-2

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       TLR4 / CD284 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 Tie2 / TEK (aa 770-1122) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       PSG6 / PSG10 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       MAX / MYC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       IL17 / IL17A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       STK40 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       nemo-like kinase / NLK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       AMPK (G1/B1/A2) Heterotrimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠小腸Cajal間質細胞N,N'-二環己基碳二亞 CP,95.0% 乙酸 98%chloramphenicol/OVA  偶聯雞卵白蛋白蛋白

      胍硝酸鹽  99%D-泛 分析標準品Gentamicin/BSA  素偶聯牛血清白蛋白

      N-芐乙 96%D-泛 98%Gentamicin/OVA  素偶聯雞卵白蛋白

      1,1-環丁烷二甲酸 99%DL-泛  99%Tetracycline/BSA  四環素偶聯牛血清白蛋白

      12-冠-4 98%化鈣 CP,98%Gentamicin/FITC  熒光素標記素

      二苯并-18-冠-6- 98%酸鈣 SUTetracycline/OVA  四環素偶聯雞卵白蛋白

      N-十二烷基-2-吡咯烷酮 99%酸鈣 98%Oxytetracycline/BSA  土霉素偶聯牛血清白蛋白

      太古油 CP,70%氫酸 AR,≥47.0%Oxytetracycline/OVA  土霉素偶聯雞卵白蛋白

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