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      大鼠支氣管成纖維細胞

      產品簡介

      大鼠支氣管成纖維細胞的相關*:10倍PB濃縮緩沖溶液 100毫升
      10倍TBST濃縮緩沖清理溶液 100毫升
      10倍PBST濃縮緩沖清理溶液 100毫升
      10倍Tris-T濃縮緩沖清理溶液 100毫升
      電子顯微鏡制片處理試劑專題
      透射電鏡(TEM)制片處理試劑盒 20次

      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-17
      廠商性質:經銷商
      訪問量:343
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X0717
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產品屬性:   

      產品名稱

      規格

      貨號

      大鼠支氣管成纖維細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X0717

      商品介紹:

      名稱    大鼠支氣管成纖維細胞   

      2.組織來源:支氣管組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      大鼠支氣管成纖維細胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。支氣管成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的大鼠支氣管成纖維細胞采用膠原酶-胰酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的大鼠支氣管成纖維細胞Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產品貨號CM-R008

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態成纖維細胞樣

      傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       MEP1B 基因全長ORF克隆

       TEK / Tie2 基因全長ORF克隆

       ANGPT2 / Angiopoietin-2 基因全長ORF克隆

       Tyrosine Hydroxylase 轉錄變體2 基因全長ORF克隆

       sFRP-1 基因全長ORF克隆

       ULBP-1 基因全長ORF克隆

       NCAM1 基因全長ORF克隆

       PKC nu / PRKD3 基因全長ORF克隆

       MEK1 基因全長ORF克隆

       neuregulin 1 (NRG1) 轉錄變體HRG-beta2 基因全長ORF克隆

      大鼠支氣管成纖維細胞0.156-10 ng/mL 人POU域第五級轉錄因子1(POU5F1)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL 人SUMO-硫酸鹽結合UBC9(UBCE9)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ferrochelatase, mitochondrial

      15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-17B

      布氏肉湯添加劑 英文名稱:Brucella Broth Additive 產品規格:2ml*5

      0.78-50 ng/mL 人PORCN蛋白(PORCN)ELISA試劑盒

      15.6-1000 pg/mL 人半蛋白抑制劑B(CSTB)ELISA試劑盒

      EC肉湯(含小倒管) 英文名稱:EC Broth 產品規格:10ml*20支/包

      0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit

      礦物鹽瓊脂 英文名稱:Mineral Salts Agar 產品規格:250g

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