熒光定量試劑盒通過熒光信號的變化來定量目標分子的數量,為科研人員和醫療工作者提供了強大的技術支持。本文將深入探討
熒光定量試劑盒的工作原理及應用場景,帶您了解這一技術。

一、工作原理
1、熒光標記
熒光定量試劑盒通常采用熒光染料或熒光標記探針來標記目標分子(如DNA、RNA或蛋白質)。這些熒光標記物能夠在固定波長的激發光照射下發出熒光信號。常見的熒光染料包括SYBR Green、EvaGreen等,它們能夠特異性地結合到雙鏈DNA上,并在受到激發時發出明亮的熒光信號。而熒光探針則基于TaqMan探針或分子信標等技術,具有更高的特異性和靈敏度。
2、實時監測
在PCR擴增過程中,熒光信號隨著目標分子數量的增加而增強。熒光定量PCR儀器通過實時監測每個循環中的熒光強度變化,生成擴增曲線。根據標準曲線或Ct值(閾值循環數),可以精確計算出樣本中目標分子的初始濃度,從而實現定量分析。
二、應用場景
1、基因表達分析
熒光定量試劑盒廣泛應用于基因表達水平的研究。通過對特定基因mRNA的定量分析,可以了解其在不同組織、細胞類型或生理狀態下的表達差異,揭示基因功能及其調控機制。
2、病原體檢測
在傳染病診斷中,熒光定量PCR技術能夠快速、準確地檢測各種病原體(如病毒、細菌、真菌等)。例如,新冠疫情期間,它被大量用于新冠病毒核酸檢測,為疫情防控提供了有力支持。