小尾寒羊瘦素(LEP)ELISA檢測(cè)試劑盒?操作步驟

小尾寒羊瘦素(LEP)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (mouse CTLA-4)

小鼠細(xì)胞色素P450(mouse Cytochrome P450)

小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)

小鼠CXCL1/KC(mouse KC)

小鼠環(huán)磷酸腺苷(mouse cAMP)

小鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(mouse cGMP)

小鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(mouse CNTF)

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)

小鼠sCD40配體(mouse sCD40 Ligand)

小鼠CD34(mouse CD34)

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)

小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)

小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a)

小鼠血清總補(bǔ)體(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羥甲基賴(lài)氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠心肌鈣蛋白T(mouse cTnT)

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠細(xì)胞色素C(mouse Cytochrome C)

小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)

小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)

小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer)

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)

小鼠β內(nèi)啡肽(mouse β-EP)

小鼠表皮生長(zhǎng)因子(mouse EGF)

小鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(mouse EGF R)

小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)

小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)

小鼠促紅細(xì)胞生成素(mouse EPO)

小鼠紅細(xì)胞生成素受體(mouse EPOR)

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(mouse ECP)

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽-78(mouse ENA-78)

小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin)

小鼠腎上腺素(mouse EPI)

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(mouse eNOS)